异丙基硫代半乳糖苷, IPTG

来源：作者：人气：-发表时间：2014-07-02 09:44:00【大中小】

异丙基硫代半乳糖苷, IPTG, ISOPROPYL-β-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE, DIOXANE FREE

异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。

基础信息

英文名	Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
别名	IPTG; Isopropyl-beta-D-thiogalactoside
产品名称	异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷; 异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖甙; 异丙基-beta-D-硫代半乳糖苷
分子结构
分子式	C₉H₁₈O₅S
分子量	238.30
CAS 登录号	367-93-1
EINECS 登录号	206-703-0

IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA（或其他带有lacZ 基因载体DNA）以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

异丙基–β- D-半乳糖苷（IPTG）是一种有效的乳糖操纵子诱导试剂，不可逆结合乳糖阻遏物。乳糖操纵子是一种常用的遗传物质，用于检测转录时的基因内插。IPTG结合阻遏物特定位点，引起构象变化，从而导致其自乳糖操纵子脱离。IPTG与生理诱导剂1,6-allolactose在结构上相似，IPTG克服了β-异乳糖对β-半乳糖苷酶降解的敏感性。由于IPTG不被代谢，使其乳糖作为碳源的生理功能，与乳糖基因表达调控功能相分离。这些特性使得IPTG成为大规模工业生产表达化合物的理想选择。

IPTG通常连接一个β-半乳糖苷酶底物,例如X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚基-beta-D-半乳糖吡喃糖苷CAS：7240-90-6）或bluo-gal (5-溴-3-吲哚基-beta-D-半乳糖吡喃糖苷 CAS：97753-82-7）, 用于测定重组有机体的乳糖表型。

使用方法

首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。然后在100 ml的琼脂培养基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。

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